项目简介
本发明公开了一种采用植物微组织直接RT-PCR检测多种植物病毒的方法，依次包括以下步骤：（1）模板RNA提取和逆转录：在实体显微镜下，用无菌注射器针刺入待检植物组织样品的某一部位（茎、叶柄或根），并停留2-3秒，然后将带有植物微组织的无菌注射器针尖直接浸入逆转录混合物中进行反应，以便进行逆转录，得到cDNA；（2）PCR反应：将步骤（1）得到的cDNA进行PCR反应，得到反应产物；（3）结果判断：将步骤（2）所得的反应产物进行电泳分析，得到检测结果；本发明方法不需要单独步骤来分离提取待检测样品的RNA，能在较短的时间内制备用于PCR反应的RNA模板，方便快捷，且不需要仪器设备；广谱性高，快速检测葡萄卷叶病毒3、苹果茎沟病毒、马铃薯卷叶病毒和黄瓜花叶病毒四种植物病毒，大大提高植物病毒检测的效率和准确性。本发明技术成熟，已发表SCI期刊论文1篇，国内北大核心期刊论文1篇。
前景分析
葡萄卷叶病毒3、苹果茎沟病毒、马铃薯卷叶病毒和黄瓜花叶病毒四种植物病毒在国家和地区之间的移动会给当地植物构成毁灭性的打击，造成数百万人民币的经济损失。本发明专利将有效提高植物病毒检出率，维护我国植物安全和生态平衡，真正发挥技术保障的“把关”与“服务”职能，同时大大节省成本。投资二十多万研发试剂盒，应用于市场，将避免因植物病毒感染所造成的数百万人民币的经济损失。因此，在农林种植行业、检疫行业有极大的市场价值。
发表论文
1、Li Jing-wei, Chen Hai-yan, Li Jiao（李姣）, Wang Qiao-chun. Growth, microtuber production and physiological metabolism in virus-free and virus-infected potato in vitro plantlets grown under NaCl-induced salt stress. European Journal of Plant Pathology, 2018, https://doi.org/10.1007/s10658-018-1485-9.
2、李姣，任秋蓉，古蕾，朱晓换. 微量植物组织直接RT-PCR反应检测4种植物病毒的方法建立与优化. 四川师范大学学报（自然科学版），2021，44(1)：111-117.
鄂公网安备 42011102004269号