成功将全长的西妥昔单抗基因分别克隆至腺病毒载体AdC68和Hu5,构建重组腺病毒AdC68-CEb和Hu5-CEb,通过WesternBlot4证明成功表达了西妥昔单抗;我们进一步通过夹心ELISA对表达的西妥昔单抗进行了定量,产量分别为639g/L和522g/L;同时,我们通过间接免疫荧光证明了所表达的西妥昔单抗与EGFR结合的特异性;并通过MTT实验证明了AdC68-CEb和Hu5-CEb显著抑制结直肠癌细胞的生长,而对正常细胞没有抑制作用;动物实验显示,用AdC68-CEb和Hu5-CEb注射4-5周龄的Balb/C小鼠,6天后检测到西妥昔单抗的浓度达到最高,约为1028.35g/L;对小鼠肿瘤模型的抑制实验结果显示,AdC68-CEb和Hu5-CEb能明显抑制肿瘤生长,甚至有60%以上的小鼠经1次治疗后肿瘤完全消退。目前,我们已完成所有实验室研究,已提交专利申请。由于腺病毒制备容易、纯化简单、产量高、安全性好、外源表达时间长等特点,因此我们研发的腺病毒载体表达西妥昔单抗制备简单、成本低、疗效好、使用方便,可充分满足临床病人的需求。另外,我们克隆于腺病毒载体的西妥昔单抗是一种可分泌蛋白。我们研发的重组腺病毒载体表达西妥昔单抗为临床相关肿瘤的治疗与研究提供了一种有效的新手段,并具有广阔的市场发展前景。